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發(fā)布時(shí)間:2021-08-04 12:41  
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廣州碩譜生物科技有限公司,反相SPE柱,是目前國(guó)內(nèi)生產(chǎn)SPE小柱較好的生產(chǎn)廠家。hlb固相萃取柱分類
普通反相液相色譜柱是一種性價(jià)比極1佳的產(chǎn)品。C18反相層析柱
采用全覆蓋鍵合硅膠作填料,穩(wěn)定性好。采用的單官能團(tuán)化學(xué)鍵技術(shù)可以避免C18分子層的合成。涂覆均勻,保證了高選擇性、高1效率的固定相分離。
普通反相液相色譜柱具有優(yōu)異的穩(wěn)定性, pH適用范圍較寬(1.5~11),峰形優(yōu)良。而且抗污染能力強(qiáng),柱子使用壽命長(zhǎng)。
一般情況下,反相液相色譜柱在使用緩沖液時(shí)還需注意以下事項(xiàng):
(a)避免使用鹽酸鹽,因?yàn)樗鼤?huì)腐蝕鋼制品;
(b)緩沖液較好的是現(xiàn)在就用,通常緩沖液是好的菌1種培養(yǎng)液,隔天或放一段時(shí)間后就會(huì)出現(xiàn)許多怪現(xiàn)象;
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使用緩沖液時(shí)要及時(shí)掌握 pH值,做到胸中有數(shù);
(d)有溫度控制的洗液道和柱子加熱到30攝氏度,便于沖洗;
(e)長(zhǎng)時(shí)間使用緩沖液應(yīng)注意觀察接頭處是否有沉淀,如有白色鹽沉淀,用10%硝1酸定期沖洗液路(拆除柱子,沖洗30 mL10%硝1酸溶液,再用5倍水沖洗)可避免液路堵塞;
(f)使用可靠的試劑來(lái)選擇緩沖液,以避免不純鹽帶來(lái)的不必要麻煩;
轉(zhuǎn)化流相是指有機(jī)相和水相的組成與分析流相相同,但溶液中沒(méi)有緩沖鹽。
在目標(biāo)物處于極性較弱的樣品基質(zhì)中時(shí),可利用極性相互作用,選擇正相萃取方式;而在極性樣品環(huán)境下,則可采用反相萃取方式。采用陽(yáng)離子交換機(jī)制,可將萃取過(guò)程中 pH調(diào)至低于目標(biāo)物 pKa的兩個(gè) pH單位,即 pH=2.16。研究發(fā)現(xiàn),保留機(jī)制的選擇主要受以下幾個(gè)因素的影響:保留機(jī)制一:目標(biāo)物官能團(tuán)的性質(zhì);保留機(jī)制二:樣品基質(zhì)的性質(zhì)。
SCX (強(qiáng)陽(yáng)離子交換)是一種以單分散型、無(wú)孔聚合物微球?yàn)檩d體的高i效離子交換色譜柱,用于快速、高i效地分離分析蛋白質(zhì)和多肽。
該 SPE色譜柱具有用于無(wú)極性和中度極性化合物的高保性烷i基合成相。
離子化固相萃取技術(shù)適合于分解為帶電離子的化合物,其作用機(jī)制是在帶電的目標(biāo)化合物離子和帶電離子相反的吸附劑之間產(chǎn)生靜電吸引。試樣基質(zhì)可以是極性的,例如水溶液,也可以是非極性的有機(jī)溶液,但實(shí)際使用時(shí)用水溶液較多,如生物體液、江河湖海等天然水、廢水等。
所分析的目標(biāo)化合物必須具有下列任何一種或多種官能團(tuán),才能通過(guò)離子力從樣品溶液中分離出來(lái):(1)可產(chǎn)生陽(yáng)離子的官能團(tuán)(帶正電荷)(2)可產(chǎn)生陰離子的官能團(tuán)(帶負(fù)電荷),而待分析的目標(biāo)化合物必須在特定 pH環(huán)境下呈離子化或中性化。
為了有效地利用離子交換機(jī)理在 SPE柱中吸附目標(biāo)化合物,需要滿足兩個(gè)條件:
目標(biāo)化合物中的離子與吸附劑基團(tuán)中的離子態(tài)帶相反電荷;
(2)萃取環(huán)境中的 pH必須使目標(biāo)化合物和吸附物上的功能基團(tuán)同時(shí)帶電;
(3)萃取環(huán)境中不得含有高濃度的競(jìng)爭(zhēng)化合物,其電荷與目標(biāo)化合物相同。
實(shí)踐中,為了滿足前兩個(gè)條件,以保證99%以上的目標(biāo)化合物和固相萃取吸附劑表面的官能團(tuán)可以是離子化或中性化狀態(tài),樣品或 SPE柱的 pH應(yīng)根據(jù)目標(biāo)化合物和固相萃取吸附劑表面官能團(tuán)的 pKa值來(lái)調(diào)整。
反相層析技術(shù)目前在 HPLC中應(yīng)用zui為廣泛,主要是因?yàn)樗m用于分析絕大多數(shù)非極性物質(zhì),以及大量可離子化的離子化合物。
反相層析包括什么?除了一些常見(jiàn)的固定相C18,C8,C4,C2,C1, CN,NH2和 Phenyl之外,還存在一些分支類型,如混合相固定相(如苯i基-己基),填充類型,在封尾和未封尾中極性內(nèi)嵌固定方式等。在反相色譜中也使用了許多其他的填料,包括聚合物、聚合型硅膠和聚合型氧化鋁、無(wú)機(jī)-有機(jī)雜化物、涂層氧化鋯和石墨化碳等。這些固定相各有其優(yōu)缺點(diǎn)。色譜柱受污染時(shí),與未受污染的色譜柱有一定區(qū)別。反相色譜柱受到污染會(huì)產(chǎn)生反壓?jiǎn)栴},必須進(jìn)行清洗和再生以恢復(fù)或接近原始狀態(tài)。
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固相萃取柱填充:固相萃取填料一般采用色譜法吸附,主要有三種類型:種是以硅膠(如C18、C8等)為基質(zhì),第二種是以高分子聚合物為基質(zhì),如聚-二乙烯苯等;第三種是以無(wú)機(jī)材料為基質(zhì),如 Frori硅藻土、氧化鋁、石墨化碳等。
固體萃取柱容量:固相萃取柱的選擇必須考慮柱容量。因?yàn)槲覀兠鎸?duì)的樣品基質(zhì)一般比較復(fù)雜,比如食物,生物樣品等等。固相萃取中,固相萃取吸附劑在吸附目標(biāo)化合物的同時(shí),也吸附具有類似性質(zhì)的雜質(zhì)。
所以,考慮柱容是指目標(biāo)化合物加可吸附的雜質(zhì)總量不能超過(guò)柱容。結(jié)果表明,當(dāng)載樣時(shí),部分目標(biāo)化合物可能無(wú)法被吸附,從而降低了回收率。
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固體萃取柱的應(yīng)用:固相萃取的方法是手工操作,即在固相萃取柱的上端連接一個(gè),通過(guò)擠壓,將萃取體排出萃取柱。
也可采用正、負(fù)壓固相萃取裝置對(duì)批量樣品進(jìn)行固相萃取。隨著科學(xué)技的發(fā)展,樣品數(shù)量不斷增加,越來(lái)越多的分析實(shí)驗(yàn)室開(kāi)始采用自動(dòng)固相萃取儀器,尤其是采用多通道固相萃取儀器處理批量樣品。