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發(fā)布時間:2020-12-03 07:05  
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在前PCR區(qū)建立PCR混合物:
⑴可以把即刻可用的“主混合物”溶液配好、分裝并保存在-20℃或4℃,在實驗室只涉及到擴(kuò)增一種或少數(shù)幾種特異序列時這樣做很有用。
⑵如果你的實驗室使用多套引物,以致于配制包括所有試劑的單一反應(yīng)混合物不夠經(jīng)濟(jì),可以考慮分裝保存夠一天的PCR成分。
⑶作為一個規(guī)則,應(yīng)該保存一套陰性、弱陽性和強(qiáng)陽性對照樣品來分析樣品配制和PCR前過程的效率和潔凈程度。而且,你也希望通過使用一個已知的弱陽性樣品來驗證你的樣品緩沖液以證明里面不含擴(kuò)增抑制物。
⑷陰性樣品要與每組樣品同時做,以分析是否存在樣品與樣品之間的污染以及是否存在PCR產(chǎn)物的污染,陰性對照應(yīng)該包括核酸以外的所有試劑。
⑸當(dāng)做陽性對照時,有兩個理由決定了應(yīng)該使用很少數(shù)量的核酸。
⑹由于必須有對照反應(yīng),對照模板的特點應(yīng)該予以考慮。
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PCR實驗室平面布局(一級屏障)
整個平面布局完全能夠滿足國家標(biāo)準(zhǔn)及標(biāo)準(zhǔn)和實驗場所要求,而且充分利用了實驗場所劃分的建筑空間,按照實驗室操作程序的要求配備了各種功能的房間,操作路線方便快捷,每間實驗室的平面尺寸都是按照各種實驗功能分配的。
設(shè)計上將實驗室主體框架為彩鋼板玻璃隔斷,顏色為啞白色,彩鋼厚度每面0.426mm,彩鋼巖棉夾芯板防火等級為不燃燒;聚苯y(tǒng)u烯彩鋼夾芯板防火等級為阻止燃燒。隔斷玻璃厚度為5mm;為防止沉積灰塵窗料使用R25mm鋁合金圓弧壓線;所有二維連接處的內(nèi)側(cè)均使用R50mm鋁合金內(nèi)圓角,暴露在外的二維連接線的外側(cè)則用R100mm鋁合金外圓角連接;彩鋼板的三維連接處使用三維接點過渡,而彩鋼板與墻面地面則用鋁合金槽鋁聯(lián)接。吊頂材料亦為彩鋼板。
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無菌實驗室裝修設(shè)計細(xì)節(jié)。
1、樣品的轉(zhuǎn)運和人員流動:分配實驗室區(qū)域,首先應(yīng)考慮工作流程、樣品 的轉(zhuǎn)運和流轉(zhuǎn)、生物因素等。
2、靈活性:無菌實驗室設(shè)計能否適應(yīng)未來發(fā)展變化的需要是其重要的。
3、無菌實驗室的設(shè)計和大小應(yīng)考慮性,滿足緊急清除和疏散出口的建筑規(guī)則,針對各實驗室情況配備設(shè)備。距危險化學(xué)試劑30米內(nèi),應(yīng)設(shè)有緊急洗眼處和淋浴室。所有的實驗室和與污染物直接接觸的地方均應(yīng)安裝洗手池,將洗手池設(shè)在出口處。洗手池應(yīng)是獨立專用的,不能與污染物處理及實驗混用。