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發(fā)布時間:2021-07-11 12:12  

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普通反相液相色譜柱是一種性價比極i佳的產(chǎn)品。C18反相層析柱

采用全覆蓋鍵合硅膠作填料,穩(wěn)定性好。采用的單官能團化學鍵技術(shù)可以避免C18分子層的合成。涂覆均勻,保證了高選擇性、高i效率的固定相分離。

普通反相液相色譜柱具有優(yōu)異的穩(wěn)定性, pH適用范圍較寬(1.5~11),峰形優(yōu)良。而且抗污染能力強,柱子使用壽命長。

一般情況下,反相液相色譜柱在使用緩沖液時還需注意以下事項:

(a)避免使用鹽酸鹽,因為它會腐蝕鋼制品;

(b)緩沖液zui好是現(xiàn)配現(xiàn)用,通常緩沖液是好的菌i種培養(yǎng)液,在試驗中隔天或放置太久都會出現(xiàn)許多異常

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固相萃取(Solid Phase Extraction,簡稱 SPE)是一種以液-固色譜分離為基礎(chǔ)的前處理技術(shù),可對目標化合物進行選擇性吸附和選擇性洗脫。按保留機理,力主要分為無極力作用、極力作用、離子交換(靜電吸引)。

以可解離帶電物質(zhì)為目標的離子交換小柱,在農(nóng)殘、獸殘的分析中,采用正、反相萃取法比較合適。今日小編就帶你詳細了解一下正、反萃取的情況。反相態(tài)是 SPE小柱中相對于流動相極性較低的分離態(tài)。本發(fā)明主要利用固定相官能團的碳氫鍵和目標化合物的碳氫鍵之間的非極性作用力,適合從極性基質(zhì)中提取分離非極性和中極性的目標物。


近幾年來,分析檢測技術(shù)取得了長足的進步,但樣品前處理仍是科研工作者面臨的挑戰(zhàn)。以下由小析姐與大家聊聊固相萃取小柱法開發(fā)中需要注意的問題。

固相萃取(Solid Phase Extraction,簡稱 SPE)是20世紀70年代中期發(fā)展起來的樣品前處理技術(shù),其用途廣泛,并日益受到人們的歡迎。按其不同的吸附填料和吸附機理,主要分為正相、反相、離子交換和混合固相萃取小柱。正相、反相固相萃取小柱主要用于萃取極性和非極性化合物,而對某些帶電物質(zhì)(離子化合物)的萃取回收率較低,例如C18固相萃取小柱,當目標化合物處于離子狀態(tài)時,C18對該化合物的能力因子顯著降低。

正相態(tài)時,溶液體系的極性應(yīng)按樣品溶劑、淋洗溶劑、洗脫溶劑的順序遞增,洗脫強度也隨之遞增。要確保所選的樣本溶劑不會洗脫目標物,所選的淋洗液應(yīng)在不洗脫目標物的前提下,zui大限度地洗脫干擾物,這樣洗脫目標物才能碰巧完全洗脫目標物。鑒于大部分化合物都具有多種功能基團,在實際操作中,主要根據(jù)目標物和干擾物的性質(zhì)考慮采用何種萃取機理。例如:2-萘胺為弱堿性化合物(pKa=4.16),在一定 pH條件下可呈陽離子化狀態(tài),同時又具有疏水和親水基。此時可根據(jù)樣品基質(zhì)選擇有利于目標物與干擾物分離的萃取機理。


反相萃取分離主要是利用固相萃取材料官能團與目標化合物碳氫鍵之間的非極性作用力。反相非極性的 SPE柱通常更適合從極性基質(zhì)中提取分離出非極性和中等極性的目標化合物。對利用非極性作用力吸附于非極性 SPE柱的目標化合物,可用氯i仿、環(huán)i己烷、乙i酸乙i酯等具有非極性的溶劑洗脫。當溶劑的洗脫強度足夠大,可以使目標化合物與吸附劑非極性基團間的范德華力不受影響時,使其在 SPE柱中順利洗脫。即使是極性更強的甲i醇,對許多化合物而言,也有足夠的非極性力量來洗脫它。有時候,單種溶劑無法完全洗脫疏水性的目標化合物,可以考慮使用二氯甲i烷:乙i酸乙i酯(1:1,體積比)。

對典型的硅膠基質(zhì)鍵合反相柱體,在不使用緩沖液的情況下,建議采用下列清洗溶劑系列:甲i醇---乙晴---75%乙晴/25%異丙i醇---異丙i醇---二氯甲i烷---己烷;每種溶劑至少沖洗10個柱體,分析柱的洗滌流速為250 mm×4.6 mm。zui終以10柱體積異丙i醇過渡,然后返回到原始流動相(不含緩沖鹽),zui后返回到初始流動相配置。如使用紫外檢測器,則應(yīng)避免選擇在紫外區(qū)域有吸收作用的溶劑,否則需要使用大量的溶劑沖洗基線,以使基線穩(wěn)定。四氫呋i喃也是常用的清潔溶劑。如懷疑柱子受到嚴重污染,也可用二甲亞砜(DMSO)或二甲i基胺與水按50:50的比例混合,用流速低于0.5 ml/min的水沖洗色譜柱。



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固相萃取產(chǎn)品采用高度均勻的聚合物微球和二氧化硅微球作為固相萃取材料的骨架,同時材料本身還具有比表面積大、高密度、功能性團狀等特點,這將顛覆市場上用尺寸不均、形狀不規(guī)則的微球作為固相萃取填料的產(chǎn)品。

均勻顆粒度的固相萃取產(chǎn)物,經(jīng)過同樣體積的淋洗后,可獲得較多的理論塔板數(shù)目,對回收不易分離的化合物有明顯幫助。

反壓小,通過率高,解決了粘性試樣堵塞柱體的問題。粒徑均勻,球形填料,使溶液與固相萃取填料充分接觸,流動速度均勻。

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選擇好 SPE柱的種類之后,我們需要確定 SPE柱的規(guī)格,即 SPE柱的裝填量?,F(xiàn)在,市場上 SPE柱填料的質(zhì)量主要有100 mg,200 mg,300 nag,500 mg,1000 mg等等。膜式 SPE柱比常規(guī) SPE柱填充量小。

通常有20 mg,30 mg,50 mg,100 mg等等。SPE柱按其尺寸分為1 mL、3 mL和6 mL三種。還有8 mL,10 mL甚至更大的 SPE柱,但是這些大體積的 SPE柱在實際中并沒有被廣泛使用。