1. 為了避免物品間的交叉污染，整個工作過程中所需要的物品應在工作開始前一字排開放置在安全柜中，以便在工作完成前沒有任何物品需要經(jīng)過空氣流隔層拿出或放入，特別注意：前排和后排的回風格柵上不能放置物品，以防止堵塞回風格柵，影響氣流循環(huán)。2. 在開始工作前及完成工作后，需維持氣流循環(huán)一段時間，完成安全柜的自凈過程，每次試驗結(jié)束應對柜內(nèi)進行清潔和消毒。其廣泛應用于微生物學、生物醫(yī)學、基因工程、生物制品等領域的科研、教學、臨床檢驗和生產(chǎn)中，是實驗室生物安全中一級防護屏障中基本的安全防護設備。3. 操作過程中，盡量減少雙臂進出次數(shù)，雙臂進出安全柜時動作應該緩慢，避免影響正常的氣流平衡。

不同型號的二級生物安全柜的主要區(qū)別在于：排氣的比例以及氣體經(jīng)過空氣高壓再循環(huán)的比例不同。生物安全柜需要氣流以保持產(chǎn)品的保護和密封，并且需要大量的能量來維持適當?shù)臍饬?。另外，不同的二級生物安全柜具有不同的排氣方式：有的安全柜將空氣過濾后直接排到室內(nèi)，有的是通過連接到專用通風管道上的套管或通過建筑物的排風系統(tǒng)排到建筑物外面。

二級生物安全柜的一個獨有特征就是由垂直層狀薄片的(無定向的)HEPA過濾器過濾后，再安全柜內(nèi)部形成向下流動的氣流。氣流不斷地沖能可產(chǎn)生空氣傳播的安全柜內(nèi)部，從而避面存放在柜體內(nèi)的樣品受到。這樣的氣流被稱作下沉氣流。