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發(fā)布時(shí)間:2021-10-09 17:42  

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       PD.的特點(diǎn)決定了它比常規(guī)的細(xì)胞培養(yǎng)基質(zhì)膠的用途更有優(yōu)勢(shì)?這使得能夠較地控制細(xì)胞表型并誘導(dǎo)組織樣結(jié)構(gòu)的形成。 PhenoDrive仿生基質(zhì)可適應(yīng) 2D和3D培養(yǎng)環(huán)境,可用于常用的塑料培養(yǎng)制品,如96孔板和24孔板、塑料培養(yǎng)瓶瓶、載玻片和3D支架。3收集器,滾筒轉(zhuǎn)速0-3000轉(zhuǎn),長(zhǎng)度30厘米,直徑8厘米。我們推薦使用PhenoDrive,是因?yàn)樗峁┝吮绕涓?jìng)爭(zhēng)產(chǎn)品例如Matrigel(或Gelmatrix)、重組層粘連蛋白、重組纖連蛋白、聚鳥(niǎo)氨酸等,實(shí)驗(yàn)可重現(xiàn)并且更經(jīng)濟(jì)。



       PHENODRIVE是一類合成的仿生細(xì)胞基質(zhì), 能夠通過(guò)細(xì)胞外基質(zhì)的特定生物配體, 對(duì)大多數(shù)細(xì)胞維持或影響其表型, 可用于細(xì)胞單培養(yǎng)或共培養(yǎng)。通過(guò)重組后的PHENODRIVE可以:

       1 在2D培養(yǎng)耗材如培養(yǎng)板、培養(yǎng)皿或培養(yǎng)瓶的表面形成一層透明的薄膜;

       2 對(duì)于懸浮細(xì)胞培養(yǎng), 以通過(guò)將PHENODRIVE直接溶解在培養(yǎng)液中;

無(wú)論上面哪一種應(yīng)用方式, 細(xì)胞均可以在較短的時(shí)間內(nèi)形成類組織樣結(jié)構(gòu)。



利用PHENODRIVE重組溶液對(duì)聚合物3D支架進(jìn)行涂布:

       如果采用乙醇溶液進(jìn)行重組, 應(yīng)確保所使用的聚合物支架不溶于乙醇 。按照粉末重組步驟, 然后用移液器移取足夠的重組溶液將支架完全覆蓋, 同樣采用自然蒸發(fā)的方法在支架的表面及空期間形成一層透明的薄膜。

注:

1、任何的中性的水介質(zhì)的溶液都可以用來(lái)對(duì)PHENODRIVE進(jìn)行重組, 包括緩沖液;

2、采用乙醇的目的是利用其揮發(fā)性來(lái)縮短溶劑蒸發(fā)的時(shí)間;



PHENODRIVE凍干粉末的使用方法:

       與傳統(tǒng)的培養(yǎng)基質(zhì)膠相比, 我們的合成基質(zhì)膠使用過(guò)程極為簡(jiǎn)單, 在室溫下即可實(shí)現(xiàn)重組使用, 這里就 PHENODRIVE的標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)用流程介紹如下:

       由于PHENODRIVE 是以無(wú)菌凍干粉末狀態(tài)進(jìn)行存儲(chǔ)的, 因此在使用時(shí)需要對(duì)其進(jìn)行重組。5通過(guò)高速旋轉(zhuǎn)收集器或使用線型收集器可制備定向納米纖維產(chǎn)品,如各種形狀的生物培養(yǎng)支架。實(shí)驗(yàn)人員可以根據(jù)需求,取適量的粉末將其溶解進(jìn)水、乙醇或培養(yǎng)液中, 這個(gè)過(guò)程非常簡(jiǎn)單, 待其溶解后得到無(wú)色、透明液體經(jīng)過(guò)濾后即可準(zhǔn)備用于培養(yǎng) , 這一過(guò)程即重組。重組后的液體可在-20℃ 的低溫下保存3至少3個(gè)月。

       對(duì)于這類耗材表面的涂布應(yīng)用, 通常建議將PHENODRIVE 凍干粉末溶解進(jìn)75% 的乙醇中, 按要求的濃度進(jìn)行重組, 將經(jīng)過(guò)濾的重組溶液澆鑄在需要涂布的器皿表面,并在無(wú)菌的環(huán)境下讓其自然蒸發(fā)(建議紫外線照射的無(wú)菌環(huán)境下), 待溶劑蒸發(fā)盡后, 即在器皿表面留下一層透明的薄膜,即完成涂布的過(guò)程。④具有納米結(jié)構(gòu)的催化劑顆粒容易團(tuán)聚,從而影響其分散性和利用率,因此靜電紡纖維材料可作為模板而起到均勻分散作用,同時(shí)也可發(fā)揮聚合物載體的柔韌性和易操作性,還可以利用催化材料和聚合物微納米尺寸的表面復(fù)合產(chǎn)生較強(qiáng)的協(xié)同效應(yīng),提高催化效能。

建議:在無(wú)情況下種植細(xì)胞, 待細(xì)胞粘附后再添加, 比如在細(xì)胞種植3小小時(shí)后。

       溶解待培養(yǎng)細(xì)胞類型的無(wú)組織培養(yǎng)基中的PHENODRIVE, 方法是按照粉末步驟配置適當(dāng)濃度的重組透明重組溶液,再將從組后的溶液與細(xì)胞懸浮液混合, 以達(dá)到0.001% ~1%(V/V)的終 PHENODRIVE 濃度。首先,在制備有機(jī)納米纖維方面,用于靜電紡絲的天然高分子品種還十分有限,對(duì)所得產(chǎn)品結(jié)構(gòu)和性能的研究不夠完善,最終產(chǎn)品的應(yīng)用大都只處于實(shí)驗(yàn)階段,尤其是這些產(chǎn)品的產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)還存在較大的問(wèn)題。細(xì)胞懸浮液的典型細(xì)胞濃度是40000個(gè)/ml ~1000000個(gè)/ml。