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發(fā)布時(shí)間:2021-01-11 07:28  
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阻斷cAMP的運(yùn)行,使得β-類shen上腺激l素受體增加而用于治l療心率不齊、高血l壓、心肌埂塞和心力l衰竭。針對cAMP的特定Ⅱ型和Ⅳ 型腺苷酸環(huán)化酶的抑制l劑,正在進(jìn)行增強(qiáng)認(rèn)知方面的臨床測試。因此為篩選出腺苷酸環(huán)化酶激l活劑或磷酸二酯酶抑制l劑,需要一個(gè)高敏感度、特異性的、可重復(fù)的方案用于檢測 cAMP的濃度。
本試劑盒利用競爭酶聯(lián)免l疫分析方法來測定細(xì)胞提取物或體外腺苷酸環(huán)化酶實(shí)驗(yàn)中的cAMP的水平。簡而言之,將羊抗鼠多克l隆抗l體包被在酶標(biāo)板上,細(xì)胞提取物或體外腺苷酸環(huán)化酶實(shí)驗(yàn)中的cAMP與固定數(shù)量的偶聯(lián)辣根過氧化物酶的cAMP或堿性磷酸酶競爭性的結(jié)合抗cAMP單克l隆抗l體,已知的cAMP作為標(biāo)準(zhǔn)品來做標(biāo)準(zhǔn)曲線。經(jīng)過一段時(shí)間孵育,洗掉所有試劑,加入底物進(jìn)行顯色。將多孔板置于酶標(biāo)l儀上,于450nm或405nm波長下,進(jìn)行讀數(shù)。黃色的光強(qiáng)度與樣品中cAMP的濃度呈反比關(guān)系。基于cAMP標(biāo)準(zhǔn)品所得曲線,通過測得的光密度可以計(jì)算出樣品中cAMP的濃度。
武漢紐斯特生物科技有限公司(WuhanNewEastBiotechonologyCo.Ltd),系美國生命科學(xué)試劑供應(yīng)商美國NewEastBio在中國的子公司。美國NewEastBio專注于生命科學(xué)和生物技術(shù)領(lǐng)域,主要產(chǎn)品有小分子、ELISA試劑盒、蛋白等,與世界高校和研究所、世界大制藥公司、生物科技公司和醫(yī)院等客戶建立了長期穩(wěn)定的合作關(guān)系,產(chǎn)品銷往全球。
環(huán)磷酸鳥苷(鳥苷-3′,5′-環(huán)化一磷酸,cGMP)在許多生理過程中發(fā)揮著重要的調(diào)控作用。cGMP由鳥苷酸環(huán)化酶產(chǎn)生,而被磷酸二酯酶降解,因此激l活鳥苷酸環(huán)化酶或者抑制磷酸二酯酶可以提高細(xì)胞內(nèi)cGMP的含量。研究發(fā)現(xiàn),cGMP特異性磷酸二酯酶的抑制l劑可用于治l療人類疾病。
樣品處理
紐斯特生物的ELISA試劑盒適用于檢測經(jīng)過鹽酸處理而終止內(nèi)源性磷酸二酯酶活性的cAMP樣品。這種樣品可直接應(yīng)用于檢測,而不需要蒸發(fā)和進(jìn)一步的處理。
組織樣本需預(yù)先冰凍于液氮中。在不銹鋼研缽中用液氮將組子樣本研磨成精細(xì)粉末。待液氮揮發(fā)完后,稱量冰凍組織樣本并加入10倍體積的0.1M HCl混勻。室溫以大于600g離心力離心,取上層清夜用0.1M HCl稀釋至適當(dāng)濃度。