免l疫印跡和檢測（所有步驟均在室溫下攪拌）

1.在電印跡步驟之后，將PVDF膜浸入100％甲l醇中15秒鐘，然后使其在室溫下干燥5分鐘。注意：如果使用硝l酸纖維素代替PVDF，則應(yīng)跳過此步驟。

2.在室溫下不斷攪拌下，在TBST中用5％脫脂奶粉或3％BSA封閉膜1小時。

將膜與抗Arf 6兔多克l隆抗l體在5％脫脂奶粉或3％BSA / TBST中以1：50?1000（取決于樣品中Arf 6蛋白質(zhì)的量）新鮮稀釋，孵育1-在室溫下持續(xù)攪拌2小時或過夜4oC。

3.用TBST將印跡的膜清洗3次，每次5分鐘。

4.將膜與二抗（例如山羊抗兔IgG，HRP偶聯(lián)物）一起孵育，在室溫下以恒定的比例在5％脫脂奶粉或3％BSA / TBST中以1：1000的比例新鮮稀釋。攪動。

5.用TBST將印跡的膜清洗3次，每次5分鐘。

6.使用您選擇的檢測方法，例如ECL。

當(dāng)前沒有直接測定法來測量Arl1 GTPases的激l活。

NewEast Biosciences Arl1激l活檢測試劑盒基于特定于配置的單克l隆抗l體，該抗l體特異性識別Arl1-GTP，但不能識別Arl1-GDP。 鑒于單克l隆抗l體對其抗原的高度親和力，可以在短時間內(nèi)進(jìn)行激l活測定。 該測定法可提供可靠的結(jié)果，并具有一致的可重復(fù)性。

武漢紐斯特生物科技有限公司（WuhanNewEastBiotechonologyCo.Ltd），系美國生命科學(xué)試劑供應(yīng)商美國NewEastBio在中國的子公司。公司位于武漢東湖高新技術(shù)開發(fā)區(qū)光谷生物城.美國NewEastBio專注于生命科學(xué)和生物技術(shù)領(lǐng)域，主要產(chǎn)品有小分子、ELISA試劑盒、蛋白等，與世界高校和研究所、世界大制藥公司、生物科技公司和醫(yī)院等客戶建立了長期穩(wěn)定的合作關(guān)系，產(chǎn)品銷往全球。

在G蛋白的四個亞家族中，G12/13亞家族的功能尚不清楚。在這個家族，有兩個成員，G12和G13，它們普遍表達(dá)。Gα12基因敲除小鼠看上去很正常。Gα13基因敲除小鼠表現(xiàn)出胚胎致死性（~E9.5）。Gα13-/-老鼠胚胎的血管系統(tǒng)有缺陷。G13對受體酪氨酸激酶的誘導(dǎo)也是必不可少的成纖維細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞的遷移。