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原位雜交電話

發(fā)布時(shí)間:2020-11-03 06:38  

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武漢思特進(jìn)科技發(fā)展有限公司成立于2007年,是一家以實(shí)驗(yàn)技術(shù)研發(fā)、實(shí)驗(yàn)產(chǎn)品研發(fā)、日化產(chǎn)品研發(fā)、實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目承接為一體的高新技術(shù)公司;公司實(shí)驗(yàn)中心有分子生物學(xué)平臺(tái)、細(xì)胞平臺(tái)、光鏡平臺(tái)、植物組培平臺(tái)、原核蛋白表達(dá)平臺(tái)、日化產(chǎn)品生產(chǎn)平臺(tái);可以開(kāi)展各類動(dòng)、植物、細(xì)菌、細(xì)胞等生物實(shí)驗(yàn)。報(bào)告首先介紹了熒光原位雜交探針行業(yè)的相關(guān)知識(shí)及國(guó)內(nèi)外發(fā)展環(huán)境,并對(duì)熒光原位雜交探針行業(yè)運(yùn)行數(shù)據(jù)進(jìn)行了剖析,同時(shí)對(duì)熒光原位雜交探針產(chǎn)業(yè)鏈進(jìn)行了梳理。





原位雜交天1. 重新水化和固定1) 吸取固定好的胚胎,加入50%的PBST溶液,放置5分鐘。預(yù)雜交1)每個(gè)管中置換成大約300ulHYB-溶液,60℃水浴5分鐘,避免振蕩。2) 置換成30%的PBST溶液,放置5分鐘3) 置換成PBST溶液,放置5分鐘,重復(fù)一次4) 置換成4%多聚甲醛的PBS溶液固定20分鐘5) 用PBST洗兩次,每次放置五分鐘,室溫。用10ul/ml的蛋白酶K在室溫下處理胚胎。5體節(jié)以下的胚胎不處理,5體節(jié)到24小時(shí)的胚胎處理3分鐘,24小時(shí)以上的胚胎處理5分鐘或者更長(zhǎng)。發(fā)育時(shí)間越短的胚胎越嫩,可以不用或者少用蛋白酶處理,發(fā)育時(shí)間長(zhǎng)的胚胎就需要用蛋白酶來(lái)疏松組織,以便于雜交。


武漢思特進(jìn)科技發(fā)展有限公司成立于2007年,是一家以實(shí)驗(yàn)技術(shù)研發(fā)、實(shí)驗(yàn)產(chǎn)品研發(fā)、日化產(chǎn)品研發(fā)、實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目承接為一體的高新技術(shù)公司;公司實(shí)驗(yàn)中心有分子生物學(xué)平臺(tái)、細(xì)胞平臺(tái)、光鏡平臺(tái)、植物組培平臺(tái)、原核蛋白表達(dá)平臺(tái)、日化產(chǎn)品生產(chǎn)平臺(tái);可以開(kāi)展各類動(dòng)、植物、細(xì)菌、細(xì)胞等生物實(shí)驗(yàn)。與病理學(xué)檢查結(jié)果比較,FISH檢測(cè)的特異性為100%,敏感性為87%。





通過(guò)熒光原位雜交(FISH)技術(shù)檢測(cè)尿液內(nèi)脫落細(xì)胞染色體異常情況,以提高早期診斷率,減少患者膀胱鏡檢查次數(shù)。自此以后,由于分子生物學(xué)技術(shù)的迅猛發(fā)展,特別是20世紀(jì)70年代末到80年代初,分子、質(zhì)粒和噬菌體DNA的構(gòu)建成功,為原位雜交技術(shù)的發(fā)展奠定了深厚的技術(shù)基礎(chǔ)。方法應(yīng)用FISH技術(shù)分析110例血尿患者尿脫落細(xì)胞染色體異常情況,其中包括86例、泌尿系12例、濾泡(腺性)4例、良性(狀瘤)4例、不明原因血尿4例。上述患者均經(jīng)膀胱鏡組織活檢確診。比較FISH檢測(cè)與病理切片檢查在確診膀胱上的區(qū)別。


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組織切片與預(yù)處理

冰凍切片:新鮮組織也可在取材后,直接置入液氮中迅速驟冷,冷凍切片后,4%多聚甲醛固定5~10min,也可保存在-70℃中待用。雜交前切片迅速恢復(fù)至室溫并干燥,0.1mol PBS洗三次,2×SSC洗10min,滴加預(yù)雜交液室溫孵育1h。