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色譜柱的使用與維護色譜柱的正確使用與維護非常重要，一不小心就會降低柱效，縮短使用壽命，甚至損壞。為了維護色譜柱，在進行色譜分析時，必須注意以下問題。調(diào)整流量過快…防止壓力、溫度急劇變化和機械振動。氣溫驟降或使色譜柱從高處落下，都會影響柱內(nèi)填充狀態(tài)；柱壓突然升高或降低，也會對柱內(nèi)填充物產(chǎn)生沖力，所以在調(diào)節(jié)流速時要緩慢進行，在閥進樣時閥的轉(zhuǎn)動不能過緩(如前面所述)。反向色譜柱…一般情況下，色譜柱不能反沖，只有生產(chǎn)者指示柱可以反沖時，才能反沖去除留在柱頭的雜質(zhì)。反之，反向?qū)⒀杆俳档椭?。前柱與保護柱…為了避免破壞固定相，應選擇適當?shù)牧鲃酉?特別是 pH)。有時候，一預柱可以在進樣器前連接，分析柱是硅膠粘合時，預柱為硅膠，可使流動相在進入分析柱前先被硅膠“飽和”，避免分析柱中的硅膠基質(zhì)溶解。不要把復雜的樣品，特別是生物樣品直接注入到柱中，需要對樣品進行預處理，或者在進樣器與色譜柱之間連接一個保護柱。保護柱一般為填充具有相似固定相的短柱。可以也應該經(jīng)常更換保護柱。

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如何排除小概率故障？【1】泵壓跳動，跳動范圍約10 bar。對策：原來的小白頭有點臟，換了之后還沒有解決；2、將主動閥上的閥芯取出后，發(fā)現(xiàn)類似氣泡存在，在超聲5分鐘內(nèi)浸入-水溶液中試著除去氣泡，重新安裝后觀察，仍未解決；更換新閥芯，安裝完畢后，再也沒有跳動，觀察一段時間后比較平穩(wěn)，順利解決。

用不同的方法對色譜柱會有不同的要求，但是每一種色譜柱都有其清潔要求，這在色譜柱上可以找到，必須按照以上的要求來進行，否則會導致色譜柱效下降，色譜柱的使用壽命縮短，檢測波長會因品種的不同而有不同的要求，這里需要指出的是要注意觀察檢測器燈能量的變化，如基線波動大，活性成分的響應值突然變小等，對檢測器電鏡能量的變化，要注意觀察到檢測器中能量的變化，如基線波動大，活性成分的響應值突然變小等，有可能是由于燈的能量不足導致的，所以實際使用時要根據(jù)實際情況更換。流動速度也因品種而異，一般為1.0 ml/min，流速不能隨意改變，尤其作為 QC人員，但作為研發(fā)人員，有時為了摸索條件或進行方法耐用性驗證，會改變流速來評估該方法的適用性。對不同品種的進樣量也有不同的規(guī)定，進樣量這個現(xiàn)在都是自動進樣，所以進樣精密度都是很好的，不用特別強調(diào)。

操作員：，作為液相操作人員，必須認真學習夜想說明書，掌握液相硬件和軟件的操作，掌握日常維護，掌握基本故障的排除與維修。普通液相的操作規(guī)程也是由操作人員起草的，因此只要嚴格按照操作要求操作，一般都不會出現(xiàn)問題，當然對液相的日常維護維護來說，特別是對液相的日常維護保養(yǎng)來說，要注意的是液相的日常維護保養(yǎng)，泵密封墊的清洗、系統(tǒng)的清洗、溶劑過濾頭的清洗等方面都不會出現(xiàn)問題，尤其是對液相的日常維護，不會造成不必要的麻煩。第二，操作者在配制液相分析樣品時，好由同一人單獨完成，以免不必要的意外誤差。4、液體安裝環(huán)境：儀表應盡量安裝在水平位置，遠離振動、電磁干擾的屋內(nèi)，有條件時盡量把液相數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)分開，一方面是防止色譜基線噪聲太大、基線不穩(wěn)等，一方面是為了減少對人體的危害。

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固相萃取柱：固相萃取是一種應用廣泛、廣受歡迎的樣品前處理技術(shù)，它是利用固體吸附劑將液體樣品中的目標化合物吸附、與樣品基體及干擾物分離，再用洗脫液洗脫或加熱解吸附，達到分離富集目標化合物的目的。這種方法是在傳統(tǒng)的液-液萃取基礎(chǔ)上，結(jié)合目前廣泛使用的液相色譜和氣相色譜固定相的基礎(chǔ)知識，利用物質(zhì)相似作用的相似相溶原理開發(fā)出來。

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固相萃取柱提取工藝：

在樣品提取前，要用一整管溶劑沖洗試管，以潤濕固相萃取柱填料。反相型硅膠和非極性吸附介質(zhì)，通常用水溶性有機i溶劑如甲i醇預處理，然后用水或緩沖溶液。在甲i醇濕吸附劑的表面和滲透性結(jié)合的烷i基相上，使硅膠表面的潤濕效率更高。有時候預處理溶劑在甲i醇之前使用。這類溶劑通常和洗脫溶劑類似，主要用于去除固相萃取管中的雜質(zhì)，以及它們對分析物的干擾，也可能是只溶于強洗脫溶劑。

正相型固相萃取硅膠和極性吸附劑介質(zhì)，通常對樣品所在的有機i溶劑進行預處理。在樣品加入去離子水或低濃度的離子緩沖溶液中進行預處理，在非極性有機i溶劑中使用離子交換填料，在樣品加入前應保證萃取柱保持濕潤。樣品加入前，在萃取柱中干燥填充后，重復進行預處理過程。再引入有機i溶劑前，用水沖洗緩沖液中的鹽份。

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固體萃取柱的應用：

單純固相萃取可以手工完成，即在固相萃取柱的上端連接一個注i射器，萃取柱通過擠壓將萃取柱中的液體排出。此外，也可采用正壓力或負壓力的固相萃取設(shè)備對批量樣品進行固相萃取。伴隨著技術(shù)的發(fā)展，樣品量的不斷增加，越來越多的分析實驗室開始采用自動固相萃取儀，尤其是多通道固相萃取儀。

固相萃取儀是利用固體吸附劑將液體樣品中的目標化合物吸附到樣品基體和干擾物，然后再用洗脫液洗脫或加熱解吸附達到分離目標化合物的目的(即樣品的分離、純化和濃縮)，旨在減少樣品基質(zhì)的干擾，提高檢測靈敏度，其應用于各種食品安全檢測、農(nóng)產(chǎn)品殘留監(jiān)測、醫(yī)i藥衛(wèi)生、環(huán)境保護、商品檢驗、自來水及化工實驗室。

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