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采用兩譜聯(lián)用定性方法

HPLC中常采用紫外光、紅外對也要色譜進行全波長掃描。然而，在工業(yè)生產(chǎn)中，常采用紫外檢測儀掃描 HPLC中的有機化合物，通過 HPLC反應(yīng)定性地得出一些未知有機化合物的有用信息。通過相關(guān)工作人員長期的經(jīng)驗，他們傾向于用液相色譜的大值對紫外線進行掃描，通過全波長掃描尋找兩個液相色譜高峰之間的聯(lián)系，然后通過上一步使用保留值的定性分析方法，對液相色譜中的未知無進行性質(zhì)的判斷。除了這些，工作人員為了使現(xiàn)代的液相色譜定性分析方法更廣泛地應(yīng)用，一般采用色譜與質(zhì)譜聯(lián)用，這樣的操作可以對未知的有機化合物進行多層次的質(zhì)譜分析，提高液相色譜的定性分析水平，在某個方面也促進了液相色譜與質(zhì)譜的聯(lián)系和應(yīng)用，為現(xiàn)代液相色譜分析方法提供了非常有效的兩用色譜定性分析方法。隨著科技的不斷進步，串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)的應(yīng)用，使得現(xiàn)代 HPLC以雙譜聯(lián)用定性分析法廣泛應(yīng)用于中藥領(lǐng)域，在中藥品種、藥品鑒定等方面技術(shù)十分成熟，同時成果也十分顯著。除采用 HPLC和 MS聯(lián)用技術(shù)外，還采用了色譜與 NMR聯(lián)用等技術(shù)，這是一種實用的兩譜聯(lián)用技術(shù)，由于這一技術(shù)對定性要求不高，因此具有很好的通用性，但也因為色譜和 NMR聯(lián)用技術(shù)的要求較低，所以它在實際應(yīng)用中的使用也較少。

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液相色譜儀輸液系統(tǒng)：

輸注系統(tǒng)即高壓恒流泵，其作用是提供穩(wěn)定、準(zhǔn)確的流量。

1、溶劑過濾頭。液體過濾頭或沉淀器主要用于過濾在流動相中可能存在的顆粒狀雜質(zhì)。長期使用后，雜質(zhì)會堵塞溶劑過濾頭的濾板孔隙，或長期使用緩沖液，過濾頭表面很容易形成一層膜，妨礙正常的流動相通過。嚴(yán)重者，即使是已經(jīng)超聲處理的溶劑，泵吸液時仍會有氣泡在四氟化輸液管中產(chǎn)生，因此要經(jīng)常清洗。清潔劑可選用乙醇或30%稀硝i酸溶液，正相系統(tǒng)需注意濾頭干燥。

2、單向閥。本單向閥的作用是確保液體朝一個方向流動，保證高壓恒流泵的穩(wěn)定注入。在日常使用中，可通過觀察壓力情況初步判斷流量是否正常。若系統(tǒng)經(jīng)過一定時間平衡，壓力應(yīng)穩(wěn)定。但是如果有壓力波動，就表示流量是不穩(wěn)定的，如果沒有壓力，表示沒有流動。大多數(shù)情況下都是由于氣門中混入了氣泡或雜質(zhì)。如果出現(xiàn)氣泡，應(yīng)將放空閥打開，按沖洗鍵將氣泡從內(nèi)部排出。如單向閥與雜質(zhì)混在一起，必須清洗。清潔溶劑可選用乙醇，安裝時要注意標(biāo)記環(huán)向。

一九七五年，由美國 Dow Chemical公司 Small等人開發(fā)出一種新型的離子交換色譜儀器，該儀器采用電導(dǎo)率檢測器，從高本底電導(dǎo)中分離出無機、有機離子，這種方法稱為離子色譜(IC)。離子層析技術(shù)使 HPLC的分析領(lǐng)域擴展到了大多數(shù)常見的無機、有機陰離子和60多種金屬陽離子的分析。近幾年來，為了滿足復(fù)雜樣品對分離柱效的需要，采用更細(xì)粒徑固定相超高壓液相色譜(UPLC)，大大提高了分離效率，使液相色譜的應(yīng)用范圍更廣。本儀器主要由進樣系統(tǒng)、輸液系統(tǒng)、在線檢測系統(tǒng)、數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)等部分組成。

20世紀(jì)80年代，國外許多分析儀器制造商開始投入大量的資金和技術(shù)力量，研制開發(fā) HPLC產(chǎn)品。大量美國、日本、法國等 HPLC儀器制造商，如美國 Waters、 HP、 SP、 Beckman、日本的島津、日立、 JASCO、法國的吉爾森等公司紛紛推出自己的產(chǎn)品，產(chǎn)品更新?lián)Q代快，性能不斷提高。例如，日本島津公司在不到十年的時間里，LC-3A、LC-4A、LC-5A、LC-6A、LC-7A、LC-8A、LC-9A、LC-10A、LC-20A等十代產(chǎn)品的發(fā)展勢頭非常迅猛。隨著液相色譜儀器性能的不斷提高，各種新的分離方式也不斷出現(xiàn)，使得液相色譜無論在技術(shù)上還是儀器上，都有了一個又一個的飛躍。

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LC從開始的流動相瓶到結(jié)束的廢液瓶之間，它的流通管道是完全封閉的，雖然內(nèi)部壓力很高，但是在色譜儀外部沒有一滴液體。如發(fā)生漏液現(xiàn)象，系統(tǒng)一般會發(fā)出報錯信號，不能正常工作。對運行人員來說，漏液是一件很痛苦的事，因為有些漏液問題直觀、容易解決，但也有一些漏液問題比較復(fù)雜，需要深入排查。

接合處漏：

接頭漏液一般發(fā)生在色譜柱的接頭上，這里的漏液現(xiàn)象比較直觀，一般是液體積流在色譜柱頭，引起壓力波動。一般情況下，可以通過擰緊或更換管道接頭來解決液體泄漏問題。但是，過壓緊固會引起金屬接頭漏液，以及塑料接頭磨損。如稍加擰緊連接頭無法解決液體泄漏問題，則應(yīng)將接頭取下，檢查是否損壞(例如卡套損壞，密封表面有雜質(zhì))；損壞的接頭應(yīng)更換。