低溫生物菌種——保存方法介紹

脫水存法

①沙土保存法，能產(chǎn)孢子的細(xì)菌及霉菌可采用此法保存,即將沙和土以3:2比例混合，經(jīng)稀酸處理洗凈過(guò)篩,裝入小試管內(nèi),裝置高度為1cm;滅菌2～3次，烘干后即可將在斜面培養(yǎng)基上生長(zhǎng)良好的孢子，用無(wú)菌蒸餾水2～2.5ml制成孢子懸液，吸取少許加入沙土管中，經(jīng)真空抽干，外觀呈松散狀態(tài),于4℃冰箱保存，保存期可達(dá)5～7年。

② 冷凍干燥法,將孢子懸浮液與保護(hù)劑（一般用脫脂牛奶）相混合，放在安瓿管內(nèi)于-20～-30℃的乙醇浴中速凍。然后，在低溫下用真空泵抽干，并用氧化磷或干冰使水汽結(jié)凍，熔封安瓿管，于低溫下保存。保存期可達(dá)5～10年之久。

③ 石蠟油封存法，在斜面菌種培養(yǎng)物上,倒上滅菌后的石蠟油，高出斜面1cm，于4℃冰箱或低溫干燥處保存，此法不適用于能利用石蠟油作碳源的微生物，保存期為一年以上。

低溫生物菌種的使用溫度

普通硝化細(xì)菌在溫度低于15°C時(shí)，活性大幅度降低，硝化速度也明顯下降，溫度低于5°C時(shí)，普通硝化細(xì)菌的生命活動(dòng)幾乎停止，處于休眠狀態(tài)，普通中溫微生物適合生長(zhǎng)溫度為25~37℃，目前污水處理廠的處理工藝大都可實(shí)現(xiàn)15°C左右氨氮達(dá)標(biāo)排放，當(dāng)溫度低于12°C時(shí)，中溫菌的活性大大降低，甚至沒(méi)有繁殖功能，使得污水廠COD、氨氮和磷處理效果變差，出水無(wú)法達(dá)標(biāo)排放，投加COD去除劑，氨氮去除劑，除磷劑等化學(xué)絮凝劑或氧化劑，在增加污水廠運(yùn)營(yíng)成本的同時(shí)，又形成了二次污染。

低溫生物菌種——常用菌種介紹

巨大芽孢菌

巨大芽孢菌(Bacillus megaterium de Bary，1884)：桿狀，末端圓，單個(gè)或呈短鏈排列。1.2-1.5×2.0-4.0微米，嚴(yán)格好氧，能運(yùn)動(dòng)，革蘭氏陽(yáng)性，芽孢1.0-1.2×1.5-2.0微米，橢圓形，中生或次端生 。芽孢從橢圓形到長(zhǎng)形不等；不能生成乙酰；菌株能運(yùn)動(dòng)，但運(yùn)動(dòng)緩慢，需要游離氧；發(fā)酵葡萄糖產(chǎn)酸；DNA的G C含量為36%-38%。 

接觸酶陽(yáng)性；水解淀粉和酪素；V-P反應(yīng)和卵黃反應(yīng)陰性。瓊脂平板微波狀，平隆，淺黃白色轉(zhuǎn)淺灰白色至淺灰褐色，表面略有光澤，在馬鈴薯塊上生長(zhǎng)，由淺黃灰色變?yōu)榛疑?。液化明膠慢、胨化牛奶、水解淀粉。 

工業(yè)上用于生產(chǎn)葡萄糖異構(gòu)酶，巨大芽孢菌在回收貴重金屬方面有著重要作用，還能降解土壤中難溶的含磷化合物，使之成為作物能吸收的可溶物巨大芽孢菌與球形芽孢菌混合培養(yǎng)時(shí)具有固氮增效作用，非常適合制成微生物肥料。 

巨大芽孢菌作為一種重要解磷細(xì)菌被廣泛應(yīng)用于農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中，將其優(yōu)化培養(yǎng)制成菌劑肥料使用，可以提高土壤肥質(zhì)，增產(chǎn)增收。近年來(lái)，隨著微生物肥料在農(nóng)業(yè)上的廣泛應(yīng)用，巨大芽孢菌以其在土壤中的解磷作用而被深入研究，是工業(yè)上生產(chǎn)解磷固鉀肥的常用菌種，同時(shí)在水體處理和提高煙葉發(fā)酵增香效果上有特別的作用。 

巨大芽孢菌能降解有機(jī)磷藥和曲霉。張廣志等人從長(zhǎng)期受有機(jī)磷藥污染的土壤中分離出3株能降解胺磷和芽孢菌，其中2株為巨大芽孢菌。孫豐芹發(fā)現(xiàn)巨大芽孢菌TRS-3對(duì)曲霉AFB1有去除作用，其發(fā)酵上清液降解AFB1的能力達(dá)到78.55%。