等溫核酸試劑盒

什么是RPA?

概念:

重組酶聚合酶擴增（Recombinase Polymerase Amplification，RPA），被稱為是可以替代PCR的核酸檢測技術。RPA技術主要依賴于三種酶:能結合單鏈核酸（寡核苷酸引物）的重組酶、單鏈DNA結合蛋白（SSB）和鏈置換DNA聚合酶。這三種酶的混合物在常溫下也有活性，適宜反應溫度在37°C左右。

RPA不受場地的限制，不需要昂貴儀器，對溫度要求低，恒溫擴增，時間短，可以在資源匱乏地區(qū)實現快速檢測的目的，目前已廣泛用于食品安全及動物疫病檢測，但國內就PRA技術在禽病病原檢測中的研究并不多。未來RPA技術可能在以下方面進一步突破：①研發(fā)專門引物設計軟件，降低引物設計難度。②反應溫度范圍拓寬，不局限于某一溫度，可在某溫度范圍內完成擴增反應。③實現多重檢測，結果判定更簡便直觀。④可擴增長片段核酸。⑤研發(fā)出低廉的酶制劑，降低成本。相信隨著技術不斷進步，勢會引起一場核酸檢測的革命，取代PCR技術在分子檢測中的霸主地位，在禽病病原的現場檢測中發(fā)揮更大的作用。

核酸試劑盒

LAMP:環(huán)介導等溫擴增法的特征是針對目標DNA鏈上的六個區(qū)段設計四個不同的引物然后再利用鏈置換反應在一定溫度下進行反應。反應只需要把基因模板、引物、鏈置換型DNA合成酶、基質等共同置于一定溫度下(60~65℃)、經一個步驟即可完成。

重組酶與引物結合形成的蛋白-DNA復合物，能在雙鏈DNA中尋找同源序列。一旦引物定位了同源序列，就會發(fā)生鏈交換反應形成并啟動 DNA合成，對模板上的目標區(qū)域進行指數式擴增。被替換的 DNA鏈與SSB結合，防止進一步替換。在這個體系中，由兩個相對的引物起始一個合成事件。

RPA是什么？

自PCR技術誕生以來已經有三十年了。從經典PCR、實時定量PCR再到現在的數字PCR，這一技術在不斷蛻變卻從未淡出我們的視野。英國TwistDx Inc公司開發(fā)的重組酶聚合酶擴增（Recombinase Polymerase Amplification，RPA），被稱為是可以替代PCR的核酸檢測技術。以此為基礎的TwistAmp? 核酸擴增產品，能夠在15分鐘內進行常溫下的單分子核酸檢測。該技術對硬件設備的要求很低，特別適合用于體外診斷、獸醫(yī)、食品安全、生物防御和農業(yè)等領域。