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發(fā)布時間:2021-09-20 04:59  
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伴隨著現(xiàn)代工業(yè)技術的不斷創(chuàng)新與進步,液相色譜作為色譜研究的一種非常有效的手段,在我國工業(yè)基地得到了廣泛的應用。HPLC更是分離小分子氣體等有機化合物的必備儀器,而液相色譜儀憑借其、高靈敏度、高分辨率,能夠適應多種分離條件,并采用固定相和流動相對有機化合物進行充分處理。所以 HPLC定性分析對于現(xiàn)代工業(yè)的進步和發(fā)展具有重要的作用,同時也加強了我國對、食品以及化工領域的滲透。
液相色譜在工業(yè)上的分析中,通常是由操控者對未知組進行定性分析,對已知的組別進行定量分析。本對液相色譜定性分析方法作了簡要的論述和分析,努力使液相色譜的過程方法能夠為 HPLC所用領域的工作提供一些幫助。HPLC定性分析方法對高沸點不易揮發(fā)、不易揮發(fā)、不易分解、分子量大的有機化合物的分析具有十分顯著的效果,對工業(yè)農業(yè)中的有機化合物也有基礎的分析。
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采用兩譜聯(lián)用定性方法
HPLC中常采用紫外光、紅外對也要色譜進行全波長掃描。然而,在工業(yè)生產中,常采用紫外檢測儀掃描 HPLC中的有機化合物,通過 HPLC反應定性地得出一些未知有機化合物的有用信息。通過相關工作人員長期的經驗,他們傾向于用液相色譜的大值對紫外線進行掃描,通過全波長掃描尋找兩個液相色譜高峰之間的聯(lián)系,然后通過上一步使用保留值的定性分析方法,對液相色譜中的未知無進行性質的判斷。除了這些,工作人員為了使現(xiàn)代的液相色譜定性分析方法更廣泛地應用,一般采用色譜與質譜聯(lián)用,這樣的操作可以對未知的有機化合物進行多層次的質譜分析,提高液相色譜的定性分析水平,在某個方面也促進了液相色譜與質譜的聯(lián)系和應用,為現(xiàn)代液相色譜分析方法提供了非常有效的兩用色譜定性分析方法。隨著科技的不斷進步,串聯(lián)質譜技術的應用,使得現(xiàn)代 HPLC以雙譜聯(lián)用定性分析法廣泛應用于中藥領域,在中藥品種、藥品鑒定等方面技術十分成熟,同時成果也十分顯著。除采用 HPLC和 MS聯(lián)用技術外,還采用了色譜與 NMR聯(lián)用等技術,這是一種實用的兩譜聯(lián)用技術,由于這一技術對定性要求不高,因此具有很好的通用性,但也因為色譜和 NMR聯(lián)用技術的要求較低,所以它在實際應用中的使用也較少。
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毛細管電泳中,樣品分子的遷移是有效電泳濁度和電滲流清潔度的綜合表現(xiàn),而此時的清凈度被稱為表觀清凈。由于石英(或玻璃)毛細管表面的硅羥基解離,在大多數(shù)水溶液中都會產生一種負的定域電荷,并指向負極。毛細管中的電滲率比電泳速度大一個數(shù)量級,因此樣品組分可以實現(xiàn)同向泳動。在電滲和電泳中,正離子的運動方向是一致的,所以它首先流出。中立分子與電滲流同速,隨電滲入。負離子在中性顆粒后面流出,其運動方向與電滲方向相反。pH值與電滲流有密切關系。電滲透受 Zeta電位的影響, Zeta電位由毛細管壁表面的電荷決定,而電荷又受緩沖溶液的 pH值影響,因此電滲流的值是緩沖溶液 pH值的函數(shù),一般隨 pH值的增加而增大,到中性或堿性時值會變得很大。另外,毛細管洗滌過程、電泳緩沖液組成、粘度、溫度等對管壁上解離的影響也會發(fā)生變化。電磁以及許多能與毛細管表面作用的物質,如表面活性劑、蛋白質等,對電滲流有很大影響。
電泳法作為一種伴隨電泳產生的電動現(xiàn)象,在電泳法中起重要作用。大多數(shù)情況下,電滲流速度是電泳速度的5-7倍。毛細管電泳(CE)利用電滲流,使中性分子、正負離子向一個方向發(fā)生差速遷移,在一次 CE過程中同時完成正負離子的分離測定。電滲流的大小和方向影響著 CE分離的效率、選擇性和分離程度,因而成為分離條件優(yōu)化的重要參數(shù)。CE分離的重復性(遷移時間和峰面積)受電滲流的微小變化嚴重影響。因此,電滲流的控制是 CE的一項重要工作??刂齐姖B流的方法主要是改變緩沖液的組成和濃度、改變緩沖液的 pH值、添加添加劑、對毛細管內壁進行改性-物理或化學方法上涂覆及動態(tài)去活;外加徑向電場;改變溫度等。