低溫生物菌種的使用溫度

普通硝化細菌在溫度低于15°C時，活性大幅度降低，硝化速度也明顯下降，溫度低于5°C時，普通硝化細菌的生命活動幾乎停止，處于休眠狀態(tài)，普通中溫微生物適合生長溫度為25~37℃，目前污水處理廠的處理工藝大都可實現(xiàn)15°C左右氨氮達標排放，當溫度低于12°C時，中溫菌的活性大大降低，甚至沒有繁殖功能，使得污水廠COD、氨氮和磷處理效果變差，出水無法達標排放，投加COD去除劑，氨氮去除劑，除磷劑等化學絮凝劑或氧化劑，在增加污水廠運營成本的同時，又形成了二次污染。

低溫生物菌種的保存方法有哪些？

（一）培養(yǎng)基保存法

利用各種斜面和半固體培養(yǎng)基，加上石蠟油保存菌種，是一種簡易的保存方法。

1.普通瓊脂斜面保存法：腸道菌、等一般細菌可接種于不含糖的普通瓊脂斜面上，斜面底部應加少許無糖肉膏湯，以防干涸。經(jīng)35℃培養(yǎng)18～24h后，移種于4℃冰箱中，一般可保存一個月，每月傳代一次。

2.血液瓊脂斜面保存法：鏈球菌、應接種于血液瓊脂斜面上，35℃培養(yǎng)生長后，置4℃冰箱中保存，鏈球菌須半個月至1個月移種一次，新分離菌株須2～4天移種一次，以后逐漸延長移種時間，在適應后可延至半個月移種一次。

3.巧克力色斜面保存法：宜保存菌，并在35℃孵箱中保存，一般每2天移種一次。

4.雞蛋斜面保存法：適于保存含有Vi抗原的沙門菌屬及其他含表面抗原的細菌，一般可保存一個月。

5.半固體穿刺保存法：將細菌接種于瓊脂半固體或瓊脂半固體內(nèi)，經(jīng)35℃培養(yǎng)18～24h，再以無菌方法加入滅菌的液體石蠟。高度約lcm，置4℃冰箱保存。保存時間可達3～6個月。

（二）干燥保存法

原理是將細菌體內(nèi)的水分蒸發(fā)掉，使其處于休眠和代謝停滯狀態(tài)，從而達到長期保存菌種的目的醫(yī)|學教|育網(wǎng)搜集整理。菌種干燥后低溫保存，可保存數(shù)年至十幾年。

（三）冷凍干燥保存法

本法又稱冷凍真空干燥法。它綜合利用了各種有利于菌種保存的因素（低溫、干燥和缺氧等），是目前有效的菌種保存方法之一。用本法保存的菌種具有成活率高，變異性小等優(yōu)點，保存期一般3～5年，有的可長達10年以上。

（四）脫脂牛奶保存法

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                                                           低溫生物菌種對沙土有什么要求？

1 沙土管制備
將河沙用60目過篩，棄去大顆粒及雜質(zhì)，再用80目過篩，去掉細沙。用吸鐵石吸去鐵質(zhì)，放入容器中用10%鹽酸浸泡，如河沙中有機物較多可用20%鹽酸浸泡。24小時后倒去鹽酸，用水洗泡數(shù)次至中性，將沙子烘干或曬干。另取地面下40～60cm非耕作層貧瘠且粘性較小的土，研碎，100目過篩,水洗至中性，烘干。將處理后的沙、土按質(zhì)量比2∶1混合。混勻的沙土分裝入安瓿管或小試管中，高度為1cm左右，塞好棉塞，121℃濕熱滅菌30min。隨機抽取滅菌后的砂土管若干支，無菌條件下取少許砂土至營養(yǎng)肉汁培養(yǎng)基中，30℃培養(yǎng)24小時，檢查無微生物生長后方可使用。
      2 斜面培養(yǎng)物的制備
      參照定期移植法。
      3 制備菌懸液
     向培養(yǎng)好的斜面培養(yǎng)物中注入3～5mL無菌水，洗下細胞或孢子制成菌懸液。用無菌吸管吸取菌懸液，均勻滴入沙土管中，每管0.2～0.5mL。霉菌可直接挑取孢子拌入沙土管中。
      4 干燥
真空抽去沙土管中水分。
      5 保藏
      將沙土管用火焰熔封后存放于低溫(4～6℃)干燥處保藏，每隔半年檢查一次菌種存活性及純度?；?qū)⑸惩凉苤苯佑门Ｆぜ埢蛩芰霞埌茫酶稍锲鲀?nèi)保存。
保藏時間2～10年。
     6 恢復培養(yǎng)
     無菌條件下打開沙土管，取部分沙土粒于適宜的斜面培養(yǎng)基上，長出菌落后再轉(zhuǎn)接一次。或取沙土粒于適宜的液體培養(yǎng)基中，增殖培養(yǎng)后再轉(zhuǎn)接斜面。