測(cè)定方法編輯常用的測(cè)定方法有取樣法和連續(xù)法。取樣法是在酶反應(yīng)開始后不同的時(shí)間，從反應(yīng)系統(tǒng)中取出一定量的反應(yīng)液，并用適當(dāng)方法停止其反應(yīng)，再根據(jù)產(chǎn)物和底物在化學(xué)性質(zhì)上的差別進(jìn)行分析，求得單位時(shí)間內(nèi)酶促反應(yīng)的變化量。連續(xù)法則是基于底物和產(chǎn)物在物理化學(xué)性質(zhì)上的不同，在反應(yīng)過程中對(duì)反應(yīng)系統(tǒng)添加酶的變性劑以終止反應(yīng)。



常用的連續(xù)測(cè)定法是光吸收測(cè)定法，即根據(jù)產(chǎn)物和底物在某一波長(zhǎng)或波段上有明顯的特征吸收差別而建立起來的連續(xù)觀測(cè)方法。幾乎所有的氧化還原酶都可用此法測(cè)定，此外如熒光法、旋光法、電化學(xué)法也是常用的連續(xù)測(cè)定方法。對(duì)不易直接測(cè)定的反應(yīng)，可使用酶偶聯(lián)分析法，即用過量、專一的“偶聯(lián)工具酶”，使被測(cè)反應(yīng)繼續(xù)進(jìn)行到某一可直接測(cè)定的階段。



在測(cè)定系統(tǒng)中是否需要分離步驟。測(cè)定法不用標(biāo)記物的蛋白結(jié)合測(cè)定法——測(cè)定法 基于被測(cè)物（抗原）與其特異結(jié)合蛋白（）結(jié)合時(shí)所出現(xiàn)的沉淀線作為測(cè)定指標(biāo)的，在測(cè)定系統(tǒng)中加入的是過量的。操作較為迅速和方便。但這一測(cè)定法只適應(yīng)于測(cè)定大分子物質(zhì)，被測(cè)物的濃度較高，只有這樣才形成能用肉眼看到的抗原-復(fù)合物，這類方法應(yīng)用較少。