同一種填料的分析柱、制備柱按線形放大公式套，分離度會不會變化？

一般會有一定的變化，原因有以下幾點：

（1）制備柱的裝填是否均勻，如不均勻則可能產(chǎn)生渦流擴散使各個組分的經(jīng)過通道的直徑不同、阻力不一樣，停留時間不同，色譜峰可能變寬。

（2）如果樣品在流動相中溶解度小，在制備色譜上會有不同的峰展寬。

（3）如果樣品在分析柱上有展寬或拖尾的現(xiàn)象，放大到制備柱上后峰的展寬和拖尾經(jīng)常會非常嚴(yán)重，導(dǎo)致分離失敗。

制備色譜柱如何測柱效？

可以選擇幾種物質(zhì)，苯，萘、蒽等的衍生物上柱，流動相一般用65-80%的甲醇/水，測定后根據(jù)保留時間計算塔板數(shù)。由于制備色譜的管路死體積一般比較大，很難得到和供應(yīng)商相同的柱效。建議在制備柱開始使用時在自己的色譜上測一下柱效，然后定期檢測柱效進行以進行比較。

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工業(yè)制備色譜

工業(yè)制備色譜系統(tǒng).電氣柜設(shè)置在機架內(nèi)部左上端,過墻兩通連接二號兩通球閥,二號兩通球閥通過單向閥連連接流量調(diào)節(jié)閥,一號質(zhì)量流量計一端連接流量調(diào)節(jié)閥,質(zhì)量流量計另一端通過混合器連接至三號三通球閥與數(shù)個進樣泵,進樣泵通過二號三通球閥連接壓力變送器,一號三通球閥通過管道分別連接至在線過濾器與二號質(zhì)量流量計,二號質(zhì)量流量計則通過壓力變送器與一號兩通球閥連接至流量計顯示器,電機連接進樣泵;采用上述技術(shù)方案后,本實用新型有益效果為:其分離效率和生產(chǎn)能力大大高于傳統(tǒng)的柱層析設(shè)備,并可實現(xiàn)在線監(jiān)測,保證產(chǎn)品的質(zhì)量.

用于制備和生產(chǎn)的大規(guī)模生物分離技術(shù)所面臨的問題是:如何在不破壞目標(biāo)蛋白質(zhì)的生物活性的前提下(溫和的條件)，以很高的識別性，以及較高的分離能力和收率，經(jīng)濟有效地從稀溶液中提取、分離、純化目標(biāo)產(chǎn)物。吸附通?？梢栽诔?、水相、適當(dāng)?shù)膒H、離子強度、避免使用等有害的化學(xué)試劑等溫和的條件下操作，液相色譜具有很高的分離性能，適合于生物分離過程的要求。