廣州碩譜生物科技有限公司Florisil固相萃取柱廠家

SPE小柱保留雜質固相萃取操作一般有三步：

1）、活化--除去柱子內的雜質并創(chuàng)造一定的溶劑環(huán)境（注意整個過程不要使小柱干涸）。

2）、上樣--將樣品轉移入柱，此時大部分目標化合物會隨樣品基液流出，雜質被保留在柱上，故此步驟要開始收集（注意流速不要過快）。

洗脫---用小體積的溶劑將組分淋洗下來并收集，合并收集液（注意流速不要過快）.

淋洗通常需要干燥，原因是什么？

回答：淋洗液一般都要干燥，主要考慮以下因素：

1.通常因為反相萃取用于化合物的預處理，正如反相萃取在色譜中是一種常見的分離方法，反相萃取中的淋洗液通常是一種水相或含水的緩沖溶液，除去水分，從而便于后續(xù)的干燥、濃縮步驟。

2.有些項目，在淋洗步驟完成后，直接用一定量的洗脫液，如1 ml甲1醇洗脫，這個過程將洗脫和定容集進行一步處理，前者的處理必然會對洗脫步驟的定量結果產

三、就是溶劑互溶問題，當淋洗過程中使用的溶劑的極性與洗脫溶劑的極性相差很大時，就會產生1乳化分層，洗脫阻力大，洗脫液有被稀釋的危險等，從而導致洗脫效果不同，從而導致試驗結果的失敗。

固相萃取操作中常見的問題

回收率低在一次完整的SPE操作中，目標化合物可能會存在于樣品溶液流出液、淋洗液、洗脫液或吸附劑中，當“目標物沒有回收或回收率低” 現(xiàn)象發(fā)生時，可向樣品溶液加入標液，然后進行完整的SPE操作并將樣品流出液、淋洗液和洗脫液分別收集并分析。

首先確定目標化合物存在于哪一部分，進而確定問題來自下列哪一環(huán)節(jié)：目標化合物在吸附劑上保留不足；目標化合物未被完全洗脫；其他環(huán)節(jié)。

由于許多化合物同時具有多種官能團，在選擇固相萃取機理時，應該根據目標化合物及干擾物的性質來考慮采用哪種萃取機理較為有利。如：2-萘胺是一個弱堿性化合物（pKa=4.16），在一定的pH條件下還可以呈陽離子狀態(tài)，同時該化合物具有疏水的非極性官能團及親水的極性官能團。這時，就應該根據樣品基質的具體情況來選擇有利于將目標化合物與干擾物分離的萃取機理。如果樣品基質中同時含有大量的非極性干擾雜質，就應該避免采用非極性的萃取機理，而將樣品的pH調節(jié)到低于其pKa兩個pH單位，即pH=2.16，并采用陽離子交換機理。反之，如果樣品中同時含有大量的陽離子干擾雜質，則應該調節(jié)樣品的pH至6.16（高于pKa兩個單位），采用非極性萃取機理較為有利。

固相萃取(Solid Phase Extraction，簡稱 SPE)是20世紀70年代中期發(fā)展起來的樣品前處理技術，其用途廣泛，并日益受到人們的歡迎。按吸附劑填料和吸附機理的不同，主要分為正相、反相、離子交換和混合固相萃取小柱，采用正相、反相固相萃取小柱，主要用于萃取分離極性和非極性化合物，但對某些帶電物質(離子化合物)的萃取回收率較低，如C18填料的固相萃取小柱，當目標化合物為離子態(tài)時，C18對該化合物的影響較小。針對這個問題，月旭推出了離子交換固相萃取硅膠基質和聚合物基質小柱。

凈化效果不理想

凈化模式的改進通常而言采用保留目標化合物的模式比保留雜質的模式凈化效果好，如果正在分析的項目為某一種或某一類化合物分析，zui好是采用保留目標化合物的凈化模式；舉一個簡單的例子，同樣是分析蔬菜中的多菌靈(一類堿性農1藥)，使用陽離子交換柱可以專一性地保留這些農1藥，使它們基本與干擾物完全分離，而使用正相吸附劑或石墨化炭黑進行保留干擾物的操作僅能把主要的干擾物除去，仍有較多干擾物存留。

另外，如果不止一種SPE柱可用于目標化合物的凈化時，應挑選選擇性好的吸附劑；選擇性方面，離子交換＞正相＞反相。

原來的是柱色譜,也叫柱層析,初始分離葉綠素時，是將碳酸鈣等粉體填入柱子中制成。隨后，薄層色譜被簡化。

化學鍵合色譜，就固定相而言，碳酸鈣、硅藻土等作固定相雖然經典，但應用范圍不夠廣。之后，有機分子利用化學反應通過共價鍵與載體(硅膠)表面結合，形成均勻牢固的單分子薄層，從而形成固定相。分離器的分離機制兼具吸附和分配兩種?？煞蛛x物質的范圍擴大了。

固體萃取柱的選用

萃取柱的選擇通常是從兩個方面來考慮的：吸附劑和柱規(guī)格的選擇。合適的吸附填料可使干擾物質與目標成分很好地分離，滿足回收要求。而且吸附劑能夠吸附的化合物的質量是有限的，當樣品量太大時，就會出現(xiàn)“過載”，使目標物直接“穿透萃取柱而不留。

吸附劑的選擇主要根據目標化合物的性質和基質的性質。

吸附劑的選擇大致可以通過上述兩種方式來選擇，具體例子中，可以根據“分清目標化合物與主要干擾物”的原則來

在選擇了合適的吸附劑后，還要根據檢定所需的試樣數量，選擇合適的柱規(guī)格。因為萃取柱中的吸附劑能吸附的化合物的質量有限，一旦超出這一數值，目標物就無法有效保留，從而大大降低洗脫效果。因此，根據樣品中的組份量選擇合適的柱規(guī)格，是很有必要的。