顯微鏡成像原理

以下以光學(xué)顯微鏡為例：

光學(xué)顯微鏡主要由目鏡、物鏡、載物臺(tái)和反光鏡組成。目鏡和物鏡都是凸透鏡，焦距不同。物鏡的凸透鏡焦距小于目鏡的凸透鏡的焦距。顯微鏡常見故障排除鏡筒的自行下滑這是生物顯微鏡經(jīng)常發(fā)生的故障之一。物鏡相當(dāng)于投影儀的鏡頭，物體通過物鏡成倒立、放大的實(shí)像。目鏡相當(dāng)于普通的放大鏡，該實(shí)像又通過目鏡成正立、放大的虛像。經(jīng)顯微鏡到人眼的物體都成倒立放大的虛像。反光鏡用來反射，照亮被觀察的物體。反光鏡一般有兩個(gè)反射面:一個(gè)是平面鏡，在光線較強(qiáng)時(shí)使用;一個(gè)是凹面鏡，在光線較弱時(shí)使用，可匯聚光線。

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顯微鏡聚光器升降機(jī)構(gòu)故障的排除

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這部分的主要故障也是自動(dòng)下滑。排除方法如下:

調(diào)整時(shí)，首先用螺絲刀把雙眼螺母中間的駐螺2退出1~2圈，軸承墊圈3是與駐螺2壓緊配合的，因此，也會(huì)跟著它一起退出，并脫離齒桿10的端面。尤其是墊得不平時(shí)，齒條的變形更厲害，結(jié)果是一部分咬得緊，一部分咬得松。然后，用雙眼螺母扳手把雙眼螺母1向調(diào)節(jié)座5旋進(jìn)。同時(shí)，用另一只手轉(zhuǎn)動(dòng)手輪，進(jìn)行試驗(yàn)，直到升降機(jī)構(gòu)松緊合適，又能停留在任意位置上時(shí)，才停止雙眼螺母的旋進(jìn)。再把駐螺旋入，使軸承墊圈接觸齒桿10就行了。

這樣調(diào)整之所以能夠排除故障，是因?yàn)檎{(diào)節(jié)座5的內(nèi)孔是錐形的。一般是定位彈片損壞(變形、斷裂、失去彈性、彈片的固定螺釘松動(dòng)等)所致,更換新彈片時(shí)，暫不要把固定螺釘旋緊，應(yīng)按本節(jié)"三(二)2"先作光軸校正。錐形軸套4在軸向有槽口，如圖10-3-4所示。當(dāng)雙眼螺母1向里旋進(jìn)時(shí)，將錐形套向里頂，使錐形套在前進(jìn)時(shí)，槽口變小，內(nèi)孔收縮，將齒桿10夾得更緊，加大了齒輪轉(zhuǎn)動(dòng)的摩擦阻力，從而制止自動(dòng)下降。

顯微鏡操作介紹

低倍、高倍、油鏡頭的識(shí)別:

(1)標(biāo)明放大倍數(shù)10×，40×，100×，或10/0.25，40/0.65，100/1.25。

(2)低倍鏡短，高倍鏡較長，油鏡長。

(3)鏡頭前面的鏡孔低倍鏡大，高倍鏡較大，油鏡小。

(4)油鏡頭上?？逃泻谏h(huán)圈，或'油'字。

低倍鏡換高倍鏡的使用方法:

(1)光線對好后，移動(dòng)推進(jìn)器尋找需要觀察的標(biāo)本。

(2)如標(biāo)本的體積較大，不能清楚查見其構(gòu)造因而不能確認(rèn)時(shí)，則將標(biāo)本移至視野中央，再旋轉(zhuǎn)高倍接物鏡于鏡筒下方。

(3)旋轉(zhuǎn)微調(diào)節(jié)器至物象清晰為止。

(4)調(diào)節(jié)聚光器及光圈，使視野內(nèi)的物象達(dá)到清晰的程度。

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顯微鏡在檢測上的作用

熒光顯微鏡除了具體傳統(tǒng)顯微鏡的明場觀察功能外，比如觀察培養(yǎng)皿里的貼壁細(xì)胞或懸浮細(xì)胞，更主要的用途是作為熒光觀察的工具；利用相應(yīng)的熒光染料對進(jìn)行標(biāo)記，通過熒光顯微鏡觀察，就可以判斷是否與病毒細(xì)胞進(jìn)行結(jié)合，在細(xì)胞核中發(fā)現(xiàn)熒光特征，就證明了病毒的存在，這是熒光的直接法觀察。(2)實(shí)習(xí)中所觀察的標(biāo)本，大多數(shù)為無色和顏色較淺，因此必須注意光線的調(diào)節(jié)。此外還有間接法熒光觀察方法，該方法對操作人員的經(jīng)驗(yàn)要求比較高。在病毒實(shí)驗(yàn)中，斑點(diǎn)熒光檢測法應(yīng)用也是非常廣泛的，該方法是對二抗進(jìn)行相應(yīng)的熒光染料標(biāo)記，然后再利用熒光顯微鏡進(jìn)行檢測，如果存在被病毒的細(xì)胞，就能形成對應(yīng)的熒光斑點(diǎn)。