等溫核酸試劑盒

據(jù)介紹，RPA檢測的靈敏度很高，能夠?qū)⒑哿康暮怂?尤其是DNA)模板擴增到可以檢出的水平，從單個模板分子得到大約1012擴增產(chǎn)物。而且RPA還用不著復雜的樣品處理，適用于無法提取核酸的實地檢測。RPA不僅可以對擴增產(chǎn)物進行終點檢測，還可以對擴增過程進行實時監(jiān)控，甚至可以通過試紙條(側(cè)流層析試紙條LFD)讀取結(jié)果。

目前，TwistAmp? 試劑盒的擴增子長度在500bp以內(nèi)。不過，經(jīng)過特別優(yōu)化的RPA擴增，也可以生成更長的擴增產(chǎn)物，或者減慢擴增速度(便于定量)，甚至在更低的溫度下進行反應。

什么是RPA?

概念:

重組酶聚合酶擴增（Recombinase Polymerase Amplification，RPA），被稱為是可以替代PCR的核酸檢測技術(shù)。RPA技術(shù)主要依賴于三種酶:能結(jié)合單鏈核酸（寡核苷酸引物）的重組酶、單鏈DNA結(jié)合蛋白（SSB）和鏈置換DNA聚合酶。這三種酶的混合物在常溫下也有活性，適宜反應溫度在37°C左右。

“一般來說，核酸檢測是目前準確的診斷方法?！庇腥烁嬖V記者，核酸檢測試劑盒出現(xiàn)假陰性，即沒有發(fā)現(xiàn)隱藏的病毒，可能與兩個方面有關。一是樣品沒有采集到。這一點很容易理解。例如，咽拭子采樣時人比較難受，深度不夠可能會采集不到含有病毒的樣本。但這樣的情況應該很少發(fā)生。

另一個假陰性的原因是核酸檢測試劑盒的探針和引物質(zhì)量有波動，特別是定量的不造成檢測的不準確。換句話說，由于這一次各家核酸檢測試劑盒供應商都是臨時啟動，有些準備不足，或是執(zhí)行規(guī)定步驟不到位，導致在生產(chǎn)過程中不進行定位，或是酶活性不足，或是酶中含有抑制酶鏈反應的重金屬離子等，都可能造成檢測結(jié)果出現(xiàn)假陰性。

由新型冠狀病毒（SARS-CoV-2）引起的新冠（COVID-19）正在世界范圍內(nèi)大規(guī)模蔓延，威脅著的公共衛(wèi)生系統(tǒng)和人類的生命健康。目前，由于缺乏有效的措施，因此盡可能多的篩選有癥狀或無癥狀者并找到他們的接觸范圍是預防新冠疫情傳播的有效方式。逆轉(zhuǎn)錄-實時定量聚合酶鏈式反應（RT-qPCR），因其高的靈敏度和特異性，是目前新冠檢測的金標準方法。但是該方法對實驗室環(huán)境、檢測儀器、以及操作人員要求相對較高，因此不利于推廣到需要現(xiàn)場即時檢測（POCT）的地方，尤其是在欠發(fā)達國家或資源匱乏的地區(qū)。