ELISA試劑盒的應(yīng)用領(lǐng)域

ELISA法是診斷中的一項(xiàng)新技術(shù)，現(xiàn)已成功地應(yīng)用于多種病原微生物所引起的病種等方面的診斷。也已應(yīng)用于大分子抗原和小分子抗原的定量測定，根據(jù)已經(jīng)使用的結(jié)果，認(rèn)為ELISA法具有靈敏、特異、簡單、快速、穩(wěn)定及易于自動(dòng)化操作等特點(diǎn)。不僅適用于臨床標(biāo)本的檢查，而且由于一天之內(nèi)可以檢查幾百甚至上千份標(biāo)本,因此，也適合于流行病學(xué)調(diào)查。本法不僅可以用來測定，而且也可用于測定體液中的循環(huán)抗原，所以也是一種早期診斷的良好方法。因此ELISA法在生物醫(yī)學(xué)各領(lǐng)域的應(yīng)用范圍日益擴(kuò)大，可概括四個(gè)方面：

1、酶染色各種細(xì)胞內(nèi)成份的定位。

2、研究抗酶的合成。

3、顯現(xiàn)微量的沉淀反應(yīng)。

4、定量檢測體液中抗原或成份。

Elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)原理

將目標(biāo)包被于微孔板中，制成固相載體，向微孔中分別加入標(biāo)準(zhǔn)品或標(biāo)本，其中的目標(biāo)連接于固相載體上的結(jié)合，然后加入微生物化的目標(biāo)，將未結(jié)合的生物素洗凈后，加入HRP標(biāo)記和親和素，再次徹底洗滌后加入TMB底物顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的目標(biāo)呈正相關(guān)。在450nm波長下測定吸光度（O.D.值），計(jì)算樣品濃度。

Elisa試劑盒技術(shù)原理

(1). 抗原或的固相化及抗原或的酶標(biāo)記。

(2). 結(jié)合在固相載體表面a的抗原或仍保持其活性。

(3). 酶標(biāo)記的抗原或既保留其活性，又保留酶的活性。

(4). 受檢標(biāo)本與固相載體表面的抗原或起反應(yīng)。再加入酶標(biāo)記的抗原或，也通過反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。

(5). 此時(shí)固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。

(6). 加入酶反應(yīng)的底物后，底物被酶催化成為有色產(chǎn)物，產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān)，故可根據(jù)呈色的深淺進(jìn)行定性或定量分析。測定方法具有很高的敏感度（pg-ng/ml水平），并且重復(fù)性好。以反應(yīng)為基礎(chǔ)，將抗原、的特異性反應(yīng)與酶對底物的有效催化作用相結(jié)合起來的一種敏感性很高的試驗(yàn)技術(shù)。