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發(fā)布時間:2021-10-15 08:01  





蛋白質(zhì)晶體板
半胱氨酸、賴氨酸的蛋白質(zhì)、以及含有金屬離子的蛋白質(zhì)。這些蛋白質(zhì)的吸附會導(dǎo)致重組蛋白質(zhì)純度大幅降低。為了解決這一問題,我們制備了兩類新材料,用于提高重組蛋白質(zhì)純度:1)通過分子印跡技術(shù),以組氨酸標(biāo)簽為模板,在IMAC材料表面形成組氨酸標(biāo)簽的分子印跡層,使得不含組氨酸標(biāo)簽的蛋白質(zhì)無法靠近IMAC材料,蛋白質(zhì)晶體培養(yǎng)板,從而提高重組蛋白純度;2)通過活性可控自由基聚合,在IMAC基質(zhì)材料表面包被了一層尺寸可控的聚合物涂層。在聚合物網(wǎng)絡(luò)的篩分作用下,進(jìn)而實(shí)現(xiàn)帶組氨酸標(biāo)簽的重組蛋白的純化。

蛋白質(zhì)晶體板介紹使用
通過紅外光譜,掃描電鏡,X射線衍射對產(chǎn)物的晶型,形貌及物相進(jìn)行了詳細(xì)表征,初步探討了文石晶體形成機(jī)理及生長機(jī)理。本文研究的主要內(nèi)容及所獲得的結(jié)論如下:1.常溫常壓下,以竹蟶韌帶纖維狀蛋白質(zhì)為基底,采用氣體擴(kuò)散法可以在較大的條件范圍內(nèi)合成出純文石晶體:即稀硫酸濃度0.1mol-L-1,NH4HCO3粉末19.0g,CaCl2濃度0.9-9.0mmol·L-1,溶液高度10-30mm,反應(yīng)溫度20-30℃,結(jié)晶時間3-12小時。而空白對照(以玻璃蓋玻片為基底)制備出的晶體主要為菱形方解石,還有少量文石和球文石。

蛋白質(zhì)結(jié)晶涉及四個重要步驟
1. 蛋白質(zhì)純度的確定。如果不夠非常純,必須要進(jìn)一步純化。
2. 蛋白質(zhì)溶解于合適的溶劑中,從中它能通過一種鹽或有機(jī)化合物而析出。溶劑通常是水-緩沖劑溶液,有時加,如2--2,蛋白質(zhì)晶體培養(yǎng)板報價,4-(MPD)。正常情況下,沉淀劑也被加入,但是濃度不高于使沉淀產(chǎn)生。對于不溶于水-緩沖劑或水-的膜蛋白,還需要加入去污劑。
3. 使溶液過飽和。在這一步中,小聚集體形成,它是晶體生長所需的核。對小分子的結(jié)晶來說,相比于蛋白質(zhì)更為人熟知,蛋白質(zhì)晶體培養(yǎng)板多少錢,晶核的自發(fā)形成需要提供表面張力能。一旦這個能障被突破了,晶體開始生長。能障在高水平的過飽和度時很容易克服。因此,在高過飽和度時,晶核更易自發(fā)形成。晶核的形成可作為一個過飽和度和其他參數(shù)的函數(shù)通過多種方法來研究,包括光散射、熒光去極化及電子顯微鏡。
4. 一旦晶核形成,晶體生長正式開始。對低分子量的化合物而言,新分子會逐步結(jié)合到正在生長的晶體表面。這是由于這些位置的結(jié)合能比較大,相對于分子結(jié)合到平滑的表面。這些步驟要么由晶系缺陷造成,要么發(fā)生在表面隨機(jī)形成的晶核。

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