液相色譜工作原理

儲(chǔ)液器中的流動(dòng)相被高壓泵打入系統(tǒng),樣品溶液經(jīng)進(jìn)樣器進(jìn)入流動(dòng)相,被流動(dòng)相載入色譜柱(固定相) 內(nèi), 由于樣品溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配系數(shù), 在兩相中作相對(duì)運(yùn)動(dòng)時(shí), 經(jīng)過(guò)反復(fù)多次的吸附- 解吸的分配過(guò)程,各組分在移動(dòng)速度上產(chǎn)生較大的差別, 被分離成單個(gè)組分依次從柱內(nèi)流出, 通過(guò)檢測(cè)器時(shí), 樣品濃度被轉(zhuǎn)換成電信號(hào)傳送到記錄儀,數(shù)據(jù)以圖譜形式打印出來(lái)。

液相色譜儀應(yīng)用范圍

它的應(yīng)用范圍比較大，而且有不斷拓展的趨勢(shì)。制備純化樣品是它的基礎(chǔ)功能，通過(guò)色譜分離，樣品中目標(biāo)物質(zhì)被分離出來(lái)有待進(jìn)一步研究，比如分離水樣中有機(jī)物、食品中以備分析等。然后是天然成分研究，有助于中藥學(xué)的發(fā)展。分析前人留下的珍貴藥典，通過(guò)藥性研究造福人類。提高產(chǎn)品質(zhì)量，以提高它的價(jià)值和效用，比如純化藥品、純化蛋白質(zhì)制品等。還有一個(gè)方向是用于產(chǎn)品合成的研究，通過(guò)獲得一些純度較高的化合物將以促進(jìn)合成實(shí)驗(yàn)的進(jìn)行。

液相色譜的操作步驟

1).首先對(duì)流動(dòng)相進(jìn)行過(guò)濾，根據(jù)需要選擇不同的濾膜，一般為有機(jī)系和水系，常用的孔徑為0.20um和0.45um。

2).對(duì)抽濾后的流動(dòng)相進(jìn)行超聲脫氣10-20分鐘。

3).正常情況下，儀器首先用甲醇沖洗10-20分鐘，然后再進(jìn)入測(cè)試用流動(dòng)相(如流動(dòng)相為緩沖試劑，則要二次重蒸水沖洗10-20分鐘，直至色譜柱中有機(jī)相沖凈為止)。

4).一般情況下，流動(dòng)相沖洗20-30分鐘后，儀器方可穩(wěn)定，重要的是儀器基線走后，方可進(jìn)樣測(cè)試。

5).同時(shí)進(jìn)兩針標(biāo)樣，將其結(jié)果相比較，其結(jié)果的比值在0.98-1.02之間后，就可以正式進(jìn)行樣品的測(cè)試了。

6).樣品測(cè)試結(jié)束后，就要進(jìn)行色譜儀及色譜柱的清洗和維護(hù)。如流動(dòng)相為緩沖試劑，同樣也要用重蒸水清洗10-20分鐘，方可用有機(jī)相進(jìn)行保護(hù)，否則，有損色譜柱。

7).關(guān)機(jī)時(shí)，先關(guān)計(jì)算機(jī)，再關(guān)液相色譜。

8).填寫(xiě)登記本，由負(fù)責(zé)人簽字。